Was ist eine DNA-Sequenzierung?
Die DNA-Sequenzierung ist ein molekularbiologisches Analyseverfahren, das die Nukleotidabfolge der DNA bestimmt und so der Entschlüsselung der Erbinformation (Genom oder Gene) von Organismen dient.
Wie teilt man den sequenzierungsansatz in vier gleiche Teile?
Teilt man den Sequenzierungsansatz in vier gleiche Teil und gibt 2’,3’- Didesoxyribonukleosid-Triphosphate hinzu, die keine freie Hydroxylgruppe mehr besitzen, kommt es zu einem Kettenabbruch, der sequenzspezifisch ist. Der Abbruch ist aufgrund der Komplementarität ebenfalls basenspezifisch, kann jedoch an jeder beliebigen Position erfolgen.
Wie ist die Sequenz eines codierenden RNA-Abschnitts möglich?
Von der Sequenz eines für Proteine codierenden DNA-Abschnitts kann damit über den codierenden RNA-Abschnitt auf die Aminosäuresequenz des gebildeten Proteins geschlossen werden. Da aber mehrere Codons für die gleiche Aminosäure stehen können, ist der umgekehrte Schluss nicht eindeutig möglich.
Was betrifft die Limitierung der Sequenzierung?
Die Limitierung der Sequenzierung (gleich den üblichen PCR -basierten Methoden) betrifft die Detektion größerer Deletionen und genomische Rearrangements. Einer solchen Direktsequenzierung entgehen krankheitsrelevante Mutationen außerhalb der untersuchten Abschnitte (z.B. in großen Introns ).
Was sind die klassischen Verfahren zur Sequenzierung?
Beginnen wir mit den klassischen Verfahren zur Sequenzierung, die beide unabhängig voneinander und fast zeitgleich (1975 und 1977) entwickelt wurden: die Methode von Maxam und Gilbert und die Sanger Sequenzierung . Das Grundprinzip der Maxam-Gilbert-Methode ist es, eine chemische Spaltung der zu untersuchenden DNA zu veranlassen.
Was ist eine zielgerichtete Sequenzierung?
Zielgerichtete Sequenzierung. Die Sequenzierung einzelner Gene, Genregionen oder Gensätze ist ein häufiger Ansatz bei der zielgerichteten Sequenzierung und wird in der Krebsforschung und der Erforschung von Erbkrankheiten verwendet, um bekannte Keimbahnen und/oder somatische Mutationen in bestimmten Genombereichen zu screenen oder zu entdecken.