Warum bei PCR DNA Primer?
Primer werden auch für die PCR-Methode (Polymerase Kettenreaktion) benötigt, zum Beispiel wenn ein bestimmter gentechnisch veränderter Organismus oder eine bestimmte Gensequenz nachgewiesen werden soll. Der Primer ist eine Spiegelbildkopie eines charakteristischen Abschnitts aus der nachzuweisenden DNA-Sequenz.
Wie sind Primer aufgebaut?
Primer können sowohl aus DNA als auch aus RNA bestehen. Bei der Replikation dient in Prokaryoten und Eukaryoten RNA als Primermaterial. In Prokaryoten synthetisiert die Primase, auch als DnaG-Protein bezeichnet, die Primersequenzen. In Eukaryoten besitzt die DNA-Polymerase α eine Primasefunktion.
Was gibt es für eine PCR-Reaktion?
Darüber hinaus gibt es zwei Arten von Primern, die für eine bestimmte PCR-Reaktion verwendet werden. Sie sind die Vorwärts- und Rückwärtsprimer. Typischerweise bindet der Vorwärtsprimer den Antisense-Strang der doppelsträngigen DNA an. Im Vergleich dazu bindet der Reverse-Primer an den Sense-Strang.
Was ist der Unterschied zwischen PCR und sequenzierungsprimern?
Der Hauptunterschied zwischen PCR-Primern und Sequenzierungsprimern besteht darin, dass die PCR-Primer wichtig für die PCR-Amplifikation sind, um ein Amplikon zu erhalten, wohingegen die Sequenzierungsprimer wichtig für die Sequenzierung eines DNA-Fragments sind, um dessen Nukleotidsequenz aufzudecken.
Wie wird die PCR eingesetzt?
Die PCR wird in biologischen und medizinischen Laboratorien für eine Vielzahl verschiedener Aufgaben verwendet, zum Beispiel für die Erkennung von Erbkrankheiten und Virusinfektionen, für das Erstellen und Überprüfen genetischer Fingerabdrücke, für das Klonieren von Genen und für Abstammungsgutachten.
Wie lange dauert die PCR-Verstärkung?
Die Verstärkung sowohl der Sense- als auch der Antisense-Stränge erfolgt in 5′- bis 3′-Richtung. Da die PCR eine exponentielle Reaktion ist, werden die drei Schritte in 25-35 Zyklen wiederholt. Sowohl Vorwärts- als auch Rückwärtsprimer werden in jedem Zyklus verwendet, um ungefähr 2 bis 35 Kopien des gewünschten DNA-Fragments herzustellen.