Warum hitzebeständige Polymerase bei PCR?
Die DNA-Polymerase, die bei der PCR verwendet wird, stammt aus dem Bakterium Thermus aquaticus. Hierbei handelt es sich um ein Tiefseebakterium aus heißen Quellen, weshalb die Polymerase sehr hitzebeständig ist.
Warum PCR Methode?
Mit Hilfe der PCR können Nachweise auf genetischer Ebene erbracht werden, etwa zur Aufklärung von Verbrechen (genetischer Fingerabdruck), zur Erkennung von Erbkrankheiten, Virusinfektionen oder zur Klärung von Verwandtschaftsverhältnissen (Vaterschaftstests, Stammbäume).
Woher stammt die Taq Polymerase?
Die Taq-Polymerase ist eine DNA-Polymerase, die aus dem thermophilen Bakterium Thermus aquaticus stammt. Das Wachstumsoptimum dieses aus heißen Quellen isolierten Bakteriums liegt bei 80 °C. Technisch wurde die Taq-Polymerase interessant als thermostabile Polymerase in der Polymerase-Kettenreaktion (PCR).
Warum hitzebeständige Polymerase?
Die Taq-Polymerase (kurz Taq) ist die DNA-Polymerase des Bakteriums Thermus aquaticus, dem sie ihren Namen verdankt. Sie ist außerordentlich hitzebeständig, da das Bakterium in Geysiren bei etwa 70 °C lebt. Das Enzym wird hauptsächlich zur DNA-Vervielfältigung mit Hilfe der Polymerase-Kettenreaktion eingesetzt.
What are the unique properties of Taq polymerase?
The unique properties of taq DNA polymerase are that it lacks its 3′ to 5′ exonuclease proofreading activity resulting in relatively low replication fidelity, it makes DNA products that have A (adenine) overhangs at their 3′ ends, this may be useful in TA cloning. Also, Taq DNA Polymerase is the standard for routine PCR.
Why is Taq polymerase so important?
Taq polymerase has the important characteristic of being stable at temperatures up to 95°C 2. That’s critical because this is the temperature at which DNA denatures – a required step at the beginning of the PCR reaction.
What does Taq polymerase stand for?
Taq polymerase (Taq DNA polymerase) is an enzyme used for synthesizing DNA in vitro by PCR technique. It is produced by the thermophilic bacterium called Thermus aquaticus that lives in hot springs and thermal vents. Taq polymerase is a thermostable enzyme which does not degrade at high temperatures.
How does Taq polymerase know when to stop DNA synthesis?
It doesn’t know when to stop, so it keeps synthesizing DNA until the end of the ’synthesis‘ phase of the reaction, when the mixture is heated up to about 95 degrees C, the strands separate, and the Taq enzyme detatches. The mixture now contains long strands of DNA, which are likely to vastly exceed 123 bp in length. 2) Cycle no. 2.