Warum wird SDS bei der Elektrophorese von Proteinen eingesetzt?
2.1 Probenvorbereitung. Das Probenmaterial wird mit Natrium-Dodecyl-Sulfat (SDS) versetzt, das sich an die Proteine lagert und diese entfaltet. Dadurch erhalten sie eine stark negative Ladung, welche die Eigenladung überdeckt. In der Folge ist das Protein nahezu vollständig denaturiert.
Was ist eine elektrophoresekammer?
Die Elektrophorese ist eine labormedizinische Untersuchung, bei der die Eiweiße des Blutes nach Gruppen getrennt werden und in ihrer relativen Verteilung Hinweise auf verschiedene Erkrankungen geben können. Das Ergebnis wird in einer einfachen Grafik dargestellt, die bei Gesunden typischerweise aus fünf Wellen besteht.
Warum SDS-Page?
SDS-PAGE wird in der Analyse von Proteinen verwendet. Als Trennmedium bei dieser Art der Elektrophorese dient ein Gel auf Polyacrylamidbasis. Zusätzlich kommt SDS (Natriumdodecylsulfat) zum Einsatz. Dieses anionische Tensid (Detergens) überdeckt die Eigenladungen von Proteinen.
Was ist eine Elektrophorese Kurve?
Was ist die Flüssigkeit bei der Elektrophorese?
Daher bezeichnet man die Flüssigkeit, in der die Wanderung bei der Elektrophorese abläuft, auch meist als Puffer. Hat man erreicht, dass die Proteine im elektrischen Feld wandern, dann werden sie auch automatisch getrennt, weil sie ja unterschiedlich schnell wandern.
Wie groß ist die Ionenstärke des Puffers?
Fettlöslichkeit und kann daher Membranen durchdringen. Dies erklärt auch seine Toxizität für viele Säugetierzellen in der Kultur. Der Puffer sollte die Ionenstärke des Systems nicht wesentlich verändern. Die physiologische Ionenstärke liegt zwischen 100 – 200 mM KCl oder NaCl.
Wie hält ein Puffer den pH-Wert einer Lösung konstant?
Ein Puffer hält den pH-Wert einer Lösung konstant, indem er Protonen aufnimmt, die während der Reaktionen freigesetzt werden, oder indem er Protonen freisetzt, wenn sie von Reaktionen verbraucht werden.
Wie verringert sich die Konzentration des Eiweißes in der Elektrophorese?
Hier kann es zu Veränderungen des Eiweißmuster in der Elektrophorese kommen. Bei einer Leberzirrhose (Endstadium chronischer Leberkrankheiten) verringert sich die Konzentration des Gesamteiweißes, insbesondere des Albumins. Albumin ist ein Eiweiß, das normalerweise 20 mg/l im Urin nicht übersteigen sollte.