Wie bestimmt man die Reinheit eines Proteins?
In der Gelelektrophorese lässt sich z.B. die molekulare Masse eines Proteins abschätzen oder der Reinheitsgrad einer Proteinpräparation bestimmen. Für die Elektrophorese von Proteinen werden hauptsächlich Gele aus dem vernetzten Polymer Polyacrylamid verwendet.
Wie werden Zellen aufgebrochen?
Zur Isolierung der Proteine müssen die Zellen zunächst lysiert (aufgebrochen) werden. Am einfachsten geschieht dies durch eine osmotische Lyse, bei der die Zellen in eine hypotonische Lösung gebracht werden. Wasser dringt in die Zellen ein und führt nach einiger Zeit zum Zerplatzen dieser Zellen.
Warum fallen Proteine durch Zugabe von Ammoniumsulfat aus?
Ammoniumsulfat ist ein Kosmotrop, das in hohen Konzentrationen Proteine über eine Dehydratisierung und den hydrophoben Effekt ausfällt, weshalb diese Fällung eine Aussalzung von Proteinen aus einer Lösung darstellt.
Warum fallen Salze aus?
Ein Salz fällt dann aus, wenn das Produkt der Ionenkonzentration größer als das Löslichkeitsprodukt ist. Da Salze unterschiedliche Löslichkeiten aufweisen, eröffnen sich somit Möglichkeiten, aus einer Salzlösung durch Zugabe geeigneter Fremdionen eine bestimmte Ionensorte selektiv auszufällen.
Was ist die Chromatographie von Proteinen?
Chromatographie von Proteinen. Die Ionenaustauschchromatographie: eine Einleitung. Ebenso wie bei anderen Arten der Chromatographie wird auch hier eine stationäre Phase (das Säulenmaterial) und eine mobile Phase (der Puffer) verwendet, wobei die stationäre Phase kovalent gebundene ionisierbare Gruppen trägt.
Was ist die Ionenaustausch-Kapazität?
Die Ionenaustausch-Kapazität ist definiert als die Zahl der Ionenaustauschergruppen pro Gewichtseinheit des Säulenfüllmaterials. Die Einheit ist Milliäquivalent pro Gramm Harz.
Was ist chromatographische Matrix?
Mit Hilfe dieses chromatographischen Verfahrens können Stoffe anhand ihrer Ladung getrennt werden. An einer polymeren Matrix befinden sich geladene funktionelle Gruppen, die reversibel Gegenionen (Kationen beim Kationenaustauscher und v.v.) gebunden haben.